Hbb-bh1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420804
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Hbb-bh1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Hbb-bh1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Hbb-bh1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420804 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Hbb-bh1 codifica una subunidad de globina embrionaria tipo β que contribuye al ensamblaje de la hemoglobina y al transporte de oxígeno durante el desarrollo temprano del ratón. Su expresión está regulada a lo largo del desarrollo dentro del clúster génico de la β-globina y se coordina con los programas de diferenciación eritroide controlados por reguladores transcripcionales y epigenéticos. Hbb-bh1 participa en el equilibrio hemo–globina y en la homeostasis redox en eritrocitos primitivos, lo que la vincula con vías que influyen en la maduración eritrocitaria y en las respuestas al estrés oxidativo. La desregulación del cambio de expresión de genes de globina y de la composición de la hemoglobina es relevante para modelar hemoglobinopatías y estudiar los mecanismos que determinan la especificación del linaje eritroide.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Hbb-bh1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Hbb-bh1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Hbb-bh1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Hbb-bh1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Hbb-bh1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Hbb-bh1 para la investigación de la señalización de Hbb-bh1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Hbb-bh1 críticos para la función de Hbb-bh1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Hbb-bh1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Hbb-bh1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Hbb-bh1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Hbb-bh1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Hbb-bh1 (m) y el plásmido HDR Hbb-bh1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Hbb-bh1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Hbb-bh1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.