Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) HB9: sc-402097-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)HB9 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HB9 (h) y el plásmido de doble nickasa HB9 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a MNX1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HB9 Anticuerpo (F-5): sc-515769
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) HB9 | sc-402097-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) HB9 | sc-402097-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MNX1 codifica el factor de transcripción homeobox HB9, un regulador de unión al ADN dependiente de secuencia, esencial para el patrón ventral de la médula espinal y la diferenciación de las motoneuronas durante el desarrollo. HB9 se integra en programas transcripcionales aguas abajo de la señalización por morfógenos y coopera con otros factores con homeodominio para establecer la identidad de subtipos neuronales, las propiedades de guía axonal y la maduración de los circuitos motores. En contextos hematopoyéticos, la expresión desregulada de MNX1 y los reordenamientos cromosómicos que implican este locus se han asociado con leucemias agudas, lo que subraya su relevancia en la especificación aberrante de linaje y el control transcripcional. Como regulador del desarrollo, MNX1 se estudia con frecuencia en modelos de neurogénesis, determinación del destino celular y desregulación transcripcional asociada a enfermedad.
HB9 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MNX1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MNX1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MNX1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MNX1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.