Plásmido Doble Nickase (h) HB-EGF: sc-400795-NIC

El gen humano **HBEGF** codifica el **factor de crecimiento similar a EGF con unión a heparina** (HB‑EGF), un ligando anclado a la membrana que puede liberarse por escisión proteolítica para generar un factor de crecimiento soluble. HB‑EGF señaliza principalmente a través de receptores de la familia **EGFR/ERBB** para regular la actividad de las vías **MAPK/ERK** y **PI3K–AKT**, influyendo en la proliferación, la supervivencia y la migración celulares, así como en la remodelación asociada a la cicatrización. Su expresión y la liberación de su ectodominio están estrechamente vinculadas a la señalización inflamatoria y sensible al estrés, y a la actividad proteasa mediada por **ADAM** en la superficie celular. La desregulación de la señalización **HBEGF/EGFR** se ha asociado con respuestas epiteliales y vasculares alteradas en contextos como la fibrosis, la biología del cáncer y la remodelación cardiovascular, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de programas impulsados por factores de crecimiento.

HB-EGF El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HBEGF en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HBEGF. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HBEGF. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HBEGF alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.