Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) HAS3: sc-401531-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)HAS3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HAS3 (h) y el plásmido de doble nickasa HAS3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HAS3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HAS3 Anticuerpo (G-12): sc-365322
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) HAS3 | sc-401531-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) HAS3 | sc-401531-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La sintasa de hialuronano 3 (HAS3) es una glicosiltransferasa asociada a la membrana que cataliza la síntesis de hialuronano, un componente principal de los glicosaminoglucanos de la matriz extracelular. Al regular la abundancia de hialuronano pericelular, HAS3 influye en la adhesión, migración y proliferación celulares, así como en la señalización inflamatoria, incluidas las interacciones con CD44 y RHAMM que acoplan la remodelación de la matriz extracelular a la dinámica del citoesqueleto. La actividad de HAS3 contribuye a la hidratación tisular y a la función de barrera, y puede modular la reparación de heridas y el crosstalk estroma–epitelio. La expresión alterada de HAS3 y el metabolismo del hialuronano se han asociado con fibrosis, inflamación crónica y la remodelación del microambiente tumoral, lo que respalda su uso como diana en estudios mecanísticos de fenotipos impulsados por la matriz extracelular.
HAS3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HAS3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HAS3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HAS3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HAS3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.