Plásmido Doble Nickase (m) HARBI1: sc-433844-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)HARBI1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HARBI1 (m) y el plásmido de doble nickasa HARBI1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Harbi1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) HARBI1 | sc-433844-NIC | 20 µg | $410.00 |
Harbi1 codifica HARBI1, una proteína domesticada derivada de una transposasa implicada en la biología del genoma y en la regulación de procesos asociados al ADN. Aunque sus funciones moleculares aún no están completamente definidas, HARBI1 se ha vinculado a vías relevantes para la reparación del ADN, la dinámica de la cromatina y el mantenimiento de la estabilidad genómica, lo que la hace de interés en estudios sobre el control del ciclo celular y las respuestas al estrés. En modelos murinos, la alteración de factores de mantenimiento del genoma puede influir en fenotipos del desarrollo y en la aptitud celular; por ello, HARBI1 se investiga en contextos en los que respuestas alteradas al daño del ADN o la regulación de la cromatina contribuyen a mecanismos relevantes para enfermedades. Comprender la actividad de HARBI1 respalda la investigación sobre cómo genes derivados de transposasas se reutilizan para modular la regulación génica en mamíferos y la integridad del genoma.
HARBI1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Harbi1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Harbi1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Harbi1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Harbi1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.