Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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hamartin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402444-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- hamartinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase hamartin (h) e o Plasmídeo Double Nickase hamartin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TSC1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:hamartin Anticorpo (C-8): sc-377386
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
hamartin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402444-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
hamartin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402444-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O TSC1 codifica a hamartina, um componente central do complexo TSC1–TSC2 que integra sinais de nutrientes e de fatores de crescimento para restringir a sinalização do mTORC1 por meio da regulação da pequena GTPase Rheb. Ao modular a síntese proteica dependente de mTORC1, a autofagia e o metabolismo celular, a hamartina contribui para o controle do crescimento celular, da proliferação e das respostas ao estresse. A disrupção do TSC1 perturba a homeostase da via PI3K–AKT–mTOR e altera programas translacionais e lisossomais a jusante. A variação genética ou a perda de função em TSC1 está fortemente associada à biologia do complexo de esclerose tuberosa e a fenótipos celulares relacionados, impulsionados por mTOR, tornando-o um alvo amplamente utilizado em estudos de vias e de mecanismos de doença.
hamartin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TSC1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TSC1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TSC1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TSC1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.