Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Gβ 5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420611
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Gβ 5 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Gβ 5, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Gβ 5 Anticuerpo (C-6): sc-515379
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Gβ 5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420611 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Gnb5 codifica la subunidad Gβ5, un componente atípico de la subunidad beta de las proteínas G que forma complejos obligatorios con proteínas RGS de la familia R7 para acelerar la hidrólisis de GTP por Gα y afinar la terminación de la señal de los GPCR. En células de ratón, los ensamblajes Gβ5–RGS regulan la cinética y la amplitud de la señalización asociada a AMPc y Ca²⁺ aguas abajo de receptores de neurotransmisores y sensoriales, modulando la excitabilidad neuronal y la transmisión sináptica. Mediante el control de vías impulsadas por GPCR, Gβ5 influye en procesos de señalización a nivel de red, incluida la neuromodulación y la adaptación a estímulos. La desregulación de la señalización asociada a GNB5 se ha vinculado a fenotipos del neurodesarrollo y sensoriales, lo que respalda su relevancia en estudios mecanísticos sobre la temporalidad de los GPCR y la función de los circuitos neuronales.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Gβ 5 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Gnb5 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Gnb5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Gnb5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Gβ 5.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Gnb5 para la investigación de la señalización de Gβ 5, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Gnb5 críticos para la función de Gβ 5
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Gnb5 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Gβ 5 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Gβ 5 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Gnb5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Gβ 5 (m) y el plásmido HDR Gβ 5 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Gnb5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Gnb5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.