Plasmide Double Nickase (h) GSTO1: sc-404107-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GSTO1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GSTO1 Double Nickase (h) et le plasmide GSTO1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GSTO1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: GSTO1 Antibody (21): sc-130317
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GSTO1 | sc-404107-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GSTO1 | sc-404107-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La glutathion S-transférase oméga 1 (GSTO1) est une enzyme cytosolique de la classe oméga des GST qui utilise le glutathion pour catalyser des réactions de thioltransférase et de déglutathionylation, influençant l’équilibre rédox cellulaire et l’état de S‑glutathionylation des protéines. Par ces activités, GSTO1 contribue à la détoxification et à la régulation des réponses au stress oxydatif, en lien avec le métabolisme du glutathion et, plus largement, avec des voies de signalisation contrôlées par le rédox. Des variations de l’expression ou de l’activité de GSTO1 ont été associées à une susceptibilité modifiée aux dommages oxydatifs et à la signalisation inflammatoire, des processus pertinents dans la neurodégénérescence, la biologie du cancer et les contextes de stress métabolique. Dans les cellules humaines, la fonction de GSTO1 est souvent étudiée en relation avec la prise en charge des électrophiles réactifs, la régulation rédox‑dépendante d’enzymes et des programmes transcriptionnels d’adaptation au stress.
GSTO1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GSTO1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GSTO1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GSTO1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GSTO1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.