Plásmido Doble Nickase (h) GSKIP: sc-412211-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GSKIP consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GSKIP (h) y el plásmido de doble nickasa GSKIP (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GSKIP. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GSKIP | sc-412211-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) GSKIP | sc-412211-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GSKIP (proteína de interacción con GSK3β) codifica una pequeña proteína andamiaje que se une a la glucógeno sintasa quinasa 3β y ayuda a posicionar esta quinasa dentro de complejos de señalización multiproteicos. Al modular eventos de fosforilación dependientes de GSK3, GSKIP puede influir en vías vinculadas a la señalización Wnt/β-catenina, a la dinámica de señalización cAMP/PKA y, de forma más amplia, al control de decisiones de destino celular, proliferación y programas de diferenciación. La regulación alterada de redes centradas en GSK3 se asocia con frecuencia a fenotipos de crecimiento y desarrollo desregulados, lo que convierte a GSKIP en un nodo útil para estudiar la comunicación cruzada entre vías. Como proteína humana con funciones de andamiaje de quinasas, GSKIP respalda estudios mecanísticos sobre la especificidad y la compartimentalización de la señalización en contextos celulares relevantes para enfermedad.
GSKIP El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GSKIP en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GSKIP. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GSKIP. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GSKIP alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.