Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
GROβ Plasmide Double Nickase (h): sc-416416-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GROβ Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GROβ Double Nickase Plasmid (h) e il GROβ Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CXCL2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GROβ Plasmide Double Nickase (h) | sc-416416-NIC | 20 µg | $410.00 |
CXCL2 codifica la chemochina GROβ (CXCL2), un ligando secreto della famiglia CXC che segnala principalmente attraverso CXCR2 per promuovere chemiotassi, adesione e attivazione dei neutrofili e di altre cellule mieloidi. GROβ viene indotta a valle di programmi trascrizionali infiammatori, inclusi i segnali NF-κB e MAPK, collegando il riconoscimento dei patogeni e le cascate citochiniche al reclutamento dei leucociti. Contribuisce a plasmare il microambiente infiammatorio locale regolando le interazioni endoteliali e coordinando il traffico delle cellule dell’immunità innata. Un’espressione deregolata di CXCL2/GROβ è associata a stati infiammatori cronici ed è stata studiata in contesti quali danno tissutale, infiammazione autoimmune e infiltrazione di cellule mieloidi associate al tumore.
GROβ Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CXCL2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CXCL2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CXCL2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CXCL2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.