GRIN1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405452

Descripción general

GPRIN1 (inductor 1 del crecimiento de neuritas regulado por proteínas G) codifica una proteína citoplasmática enriquecida en neuronas que se asocia con complejos de señalización de membrana para acoplar proteínas G activadas a la remodelación del citoesqueleto. Se ha implicado en la extensión de neuritas, la dinámica del cono de crecimiento y la plasticidad sináptica mediante la regulación de procesos dependientes de actina y de eventos de señalización proximales al receptor. GPRIN1 se ha vinculado a vías relacionadas con el desarrollo neuronal y la excitabilidad, y se estudia en el contexto de fenotipos del neurodesarrollo y de mecanismos neurodegenerativos, donde la alteración de la arquitectura de las neuritas y de la función sináptica contribuye a la biología de la enfermedad. Estas propiedades convierten a GPRIN1 en un objetivo útil para desentrañar el acoplamiento entre señalización y estructura en modelos neuronales humanos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO GRIN1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GPRIN1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GPRIN1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GPRIN1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GRIN1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GPRIN1 para la investigación de la señalización de GRIN1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de GPRIN1 críticos para la función de GRIN1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GPRIN1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido GRIN1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GRIN1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GPRIN1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GRIN1 (h) y el plásmido HDR GRIN1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GPRIN1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GPRIN1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.