Plásmido Doble Nickase (h) GRB14: sc-405224-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GRB14 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GRB14 (h) y el plásmido de doble nickasa GRB14 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GRB14. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GRB14 | sc-405224-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) GRB14 | sc-405224-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRB14 (proteína 14 unida al receptor del factor de crecimiento) es una proteína adaptadora que se une a receptores tirosina quinasa activados, con funciones destacadas en la modulación de la señalización del receptor de insulina y de IGF1R. Al interactuar con sitios de fosforilación del receptor y con efectores aguas abajo, GRB14 influye en la salida de las vías PI3K–AKT y MAPK, moldeando el metabolismo celular, la proliferación y la regulación por retroalimentación. La actividad alterada de GRB14 se ha relacionado con una señalización de insulina desregulada y fenotipos metabólicos, y su contexto de señalización también es relevante para estados celulares impulsados por factores de crecimiento estudiados en biología del cáncer. Como regulador tipo andamiaje, GRB14 ofrece un nodo accesible para diseccionar el ajuste fino de las vías y los mecanismos de atenuación de la señal en células humanas.
GRB14 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GRB14 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GRB14. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GRB14. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GRB14 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.