GPS2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406290
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- GPS2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico GPS2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
GPS2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406290 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El supresor 2 de la vía de la proteína G (GPS2) es una proteína adaptadora multifuncional que regula la transcripción dependiente de señales e integra señales de estrés, inflamación y metabolismo. Se conoce principalmente como un componente del complejo correpresor del receptor nuclear (NCoR)/SMRT–HDAC3, donde modula el estado de la cromatina y reprime programas de expresión génica aguas abajo de vías como la señalización de TNF/NF-κB y MAPK. GPS2 también contribuye al control de la señalización retrógrada mitocondrial y la proteostasis al coordinar procesos dependientes de ubiquitina y respuestas transcripcionales al estrés celular. La actividad desregulada de GPS2 se ha vinculado con cambios en la expresión de genes inflamatorios y con fenotipos metabólicos, lo que respalda su uso como un nodo para estudiar la corregulación transcripcional en contextos relevantes para enfermedades.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO GPS2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GPS2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GPS2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GPS2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GPS2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GPS2 para la investigación de la señalización de GPS2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de GPS2 críticos para la función de GPS2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GPS2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido GPS2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GPS2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GPS2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GPS2 (h) y el plásmido HDR GPS2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GPS2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GPS2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.