Plasmide Double Nickase (m) GPR87: sc-429972-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) GPR87 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GPR87 Double Nickase (m) et le plasmide GPR87 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Gpr87. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) GPR87 | sc-429972-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin *Gpr87* code GPR87, un récepteur couplé aux protéines G de type rhodopsine, impliqué dans le couplage des signaux extracellulaires à la signalisation intracellulaire par seconds messagers et aux programmes transcriptionnels. Les activités rapportées relient GPR87 à la régulation de la progression du cycle cellulaire, à la signalisation en réponse au stress et à l’homéostasie épithéliale via des voies associées aux GPCR, telles que MAPK/ERK et des processus dépendants de PI3K. Une expression altérée de GPR87 a été associée à des phénotypes prolifératifs et à la biologie des tumeurs épithéliales, ce qui en fait une cible utile pour disséquer des réseaux de signalisation GPCR dépendants du contexte. Dans des modèles murins et des systèmes cellulaires, la perturbation de *Gpr87* permet des études mécanistiques de la signalisation induite par le récepteur, du contrôle de l’état de différenciation et des interactions entre voies de signalisation.
GPR87 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Gpr87 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Gpr87. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Gpr87. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Gpr87.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.