Plásmido Doble Nickase (m) GPR55: sc-432690-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)GPR55 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GPR55 (m) y el plásmido de doble nickasa GPR55 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Gpr55. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) GPR55 | sc-432690-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) GPR55 | sc-432690-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen Gpr55 del ratón codifica GPR55, un GPCR huérfano de clase A que responde a lípidos bioactivos y se acopla a múltiples efectores aguas abajo, incluidos RhoA/ROCK, ERK/MAPK y la señalización de Ca²⁺ mediada por PLC. La actividad de GPR55 influye en la remodelación del citoesqueleto, la migración celular y la proliferación, y puede modular la señalización inflamatoria mediante interacción cruzada con vías relacionadas con el sistema endocannabinoide. En el sistema inmunitario y el tejido nervioso, se ha implicado a GPR55 en la configuración de las respuestas de citocinas, la neuroinflamación y la excitabilidad neuronal. La desregulación de la señalización de GPR55 se ha asociado en modelos experimentales con trastornos inflamatorios, fenotipos relacionados con el dolor, cambios en la remodelación ósea y una homeostasis metabólica alterada, lo que respalda su uso en estudios mecanísticos de redes de señalización impulsadas por GPCR.
GPR55 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Gpr55 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Gpr55. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Gpr55. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Gpr55 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.