Plásmido Doble Nickase (h) GPR35: sc-416792-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GPR35 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GPR35 (h) y el plásmido de doble nickasa GPR35 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GPR35. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GPR35 | sc-416792-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) GPR35 | sc-416792-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPR35 codifica un receptor acoplado a proteínas G de tipo rodopsina, enriquecido en tejidos inmunitarios y gastrointestinales, que se acopla principalmente a vías de señalización asociadas a Gi/o y a β-arrestina. La activación del receptor modula rutas de segundos mensajeros que convergen en la señalización MAPK/ERK, el flujo de calcio y programas quimiotácticos, influyendo en la producción de citocinas y el tráfico de leucocitos. GPR35 se ha estudiado en el contexto de la inflamación mucosa y la regulación de la barrera epitelial, y se ha descrito su expresión en múltiples microambientes tumorales, donde puede moldear la señalización metabólica e inflamatoria. Estas propiedades hacen de GPR35 una diana útil para analizar la inmunorregulación impulsada por GPCR, las respuestas epiteliales y la comunicación cruzada del microambiente en modelos celulares humanos.
GPR35 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GPR35 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GPR35. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GPR35. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GPR35 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.