Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
GlyRS Antibody (A-6): sc-373904. Western blot analysis of GlyRS expression in Jurkat (A), K-562 (B), AN3 CA (C), HeLa (D), c4 (E) and A-10 (F) whole cell lysates.
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GlyRS双切口酶质粒(h): sc-404105-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- GlyRS 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- GlyRS双切酶质粒（h）和GlyRS双切酶质粒（h2）编码针对GARS的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：GlyRS: sc-365311，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
GlyRS双切口酶质粒(h) | sc-404105-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GlyRS双切口酶质粒(h2) | sc-404105-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GARS 编码人源甘氨酰‑tRNA 合成酶（GlyRS），这是一种位于胞质的氨酰‑tRNA 合成酶，负责将甘氨酸连接到 tRNA^Gly 上，为核糖体翻译提供所需的氨酰化 tRNA。通过维持翻译保真性与蛋白质稳态（proteostasis），GlyRS 支持包括蛋白质合成、应激反应以及对高翻译通量有需求的高能耗细胞状态等核心过程。GARS 的失调或突变已被关联到外周神经病变表型，提示神经元与轴突系统对 tRNA 充装异常和蛋白质稳态改变非常敏感。作为一种进化上保守的管家型酶，但在不同组织中存在特异性易损性，GlyRS 常被用于神经退行性变、蛋白毒性应激以及依赖翻译的信号通路等研究模型中。
GlyRS 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 GARS 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GARS内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏GARS的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了GARS基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。