Plásmido CRISPR/CAS9 KO de glioxalasa I (m): sc-430964. Análisis por Western blot de la expresión de glioxalasa I en lisados de células enteras NIH/3T3 transfectadas con el vector vacío de control (A) y con el plásmido CRISPR/CAS9 KO de glioxalasa I (B). Blot sondado con glioxalasa I (D-5): sc-133214. β-actina (C4): sc-47778 utilizado como control de especificidad y de carga.
Plásmido CRISPR/CAS9 KO de glioxalasa I (m): sc-430964. Análisis por Western blot de la expresión de glioxalasa I en lisados de células enteras NIH/3T3 transfectadas con el vector vacío de control (A) y con el plásmido CRISPR/CAS9 KO de glioxalasa I (B). Blot sondado con glioxalasa I (D-5): sc-133214. β-actina (C4): sc-47778 utilizado como control de especificidad y de carga.
Los plásmidos consisten en Glyoxalase I una guia especifica de ARN de 20 nt, obtenida de la libreria GeCKO (v2)
las secuencias del gRNA dirigen a la proteina Cas9 para que genere un corte de doble cadena (DSB) especificamente en el ADN del gen
Hay disponibles plásmidos CRISPR específicos de dianas tanto para la inactivación como para la activación de genes. Consulte la información detallada del producto en las pestañas a continuación
Todos los productos se proporcionan listos para usar, plásmidos purificados de ADN, excepto las Partículas Lentivirales que son envasadas como Párticulas Lentivirales para usar con células dificiles de transfectar.
ENLACES RÁPIDOS
Información sobre pedidos
CRISPR/Cas9 KO Plasmid
HDR Plasmid
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Glyoxalase Anticuerpos para el análisis de respuestas celulares a Glyoxalase Productos CRISPR
Los plásmidos RISPR/Cas9 KO, Plásmidos Doble Nickase y Plásmidos de Activación CRISPR/dCas9 se consideran productos "Licensed Product" y se utilizarán de acuerdo con la Licencia/Etiqueta Limitada haga click aquí.
Description
20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
Glyoxalase I Plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) consiste en un conjunto de tres plásmidos, cada uno expresa una nucleasa Cas9 y una Glyoxalase I- guia de RNA de 20 nt (gRNA) diseñada para aumentar la eficiencia del Knockout
Las secuencias del gRNA provienen de la biblioteca genómica GeCKO (v2) y dirigen a la proteína Cas9 para producir la rotura de la doble cadena (DSB) en el ADN genómico (%link_11%)
Para seleccionar las células que contienen un doble corte producido por Cas9, se recomienda la co-trasnfección con Glyoxalase I Plásmido HDR (m) (sc-430964-HDR)
Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Glyoxalase I Anticuerpo (D-5): sc-133214
20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
Glyoxalase I Plásmido HDR (m) está recomendado para co -transfectar con Glyoxalase I Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m)
Glyoxalase I Plásmido HDR (m) es un conjunto de 2-3 plásmidos, cada uno contienen una una plantilla para la Reparación del ADN por Homología Dirigida (HDR) correspondientes a los cortes generados por Glyoxalase I Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m)
Cada plantilla HDR contiene dos brazos homólogos de 800 pares de bases, diseñados para unirse específicamente al ADN genómico que rodea el corte inducido por Cas 9
Cada plásmido HDR inserta un gen de resistencia a puromicina para permitir la selección de células con knockout (KO) y RFP (Proteína Roja Fluorescente) para verificar visualmente la transfección
La resistencia a Puromicina y el gen RFP están flanqueados por dos sitios LoxP, para permitir un posterior procesamiento con el Cre Vector sc-418923