Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) Glutathione Peroxidase 1/GPX1: sc-400631-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Glutathione Peroxidase 1/GPX1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Glutathione Peroxidase 1/GPX1 (h) y el plásmido de doble nickasa Glutathione Peroxidase 1/GPX1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GPX1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Glutathione Peroxidase 1/GPX1 | sc-400631-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Glutathione Peroxidase 1/GPX1 | sc-400631-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La glutatión peroxidasa 1 (GPX1) es una selenoenzima citosólica que reduce el peróxido de hidrógeno y los hidroperóxidos lipídicos a agua y los alcoholes correspondientes utilizando glutatión, limitando así el daño oxidativo a proteínas, lípidos y ADN. Como componente central de la homeostasis redox celular, GPX1 se relaciona con el metabolismo del glutatión, la señalización por especies reactivas de oxígeno y las respuestas antioxidantes al estrés, que modulan la función mitocondrial y la señalización inflamatoria. La alteración de la actividad o la expresión de GPX1 se ha asociado con estrés oxidativo desregulado, inestabilidad genómica y cambios en los programas de apoptosis y proliferación. Estas características hacen de GPX1 un nodo útil para estudiar la regulación dependiente del estado redox a través de vías metabólicas y de adaptación al estrés.
Glutathione Peroxidase 1/GPX1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GPX1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GPX1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GPX1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GPX1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.