Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Glutathione Peroxidase 1/GPX1 Plasmide Double Nickase (h): sc-400631-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Glutathione Peroxidase 1/GPX1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Glutathione Peroxidase 1/GPX1 Double Nickase Plasmid (h) e il Glutathione Peroxidase 1/GPX1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GPX1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Glutathione Peroxidase 1/GPX1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400631-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Glutathione Peroxidase 1/GPX1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400631-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La glutatione perossidasi 1 (GPX1) è una selenoenzima citosolica che riduce il perossido di idrogeno e gli idroperossidi lipidici ad acqua e ai corrispondenti alcoli utilizzando il glutatione, limitando così il danno ossidativo a proteine, lipidi e DNA. In quanto componente centrale dell’omeostasi redox cellulare, GPX1 si intreccia con il metabolismo del glutatione, la segnalazione delle specie reattive dell’ossigeno e le risposte antiossidanti allo stress che modellano la funzione mitocondriale e la segnalazione infiammatoria. Alterazioni dell’attività o dell’espressione di GPX1 sono state associate a una disregolazione dello stress ossidativo, instabilità genomica e cambiamenti nei programmi di apoptosi e proliferazione. Queste caratteristiche rendono GPX1 un nodo utile per studiare la regolazione redox-dipendente lungo vie metaboliche e di adattamento allo stress.
Glutathione Peroxidase 1/GPX1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GPX1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GPX1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GPX1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GPX1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.