Glutathione Peroxidase 1/GPX1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400631

Descripción general

GPX1 codifica la selenoenzima citosólica glutatión peroxidasa 1, una importante proteína de defensa antioxidante que reduce el peróxido de hidrógeno y los hidroperóxidos lipídicos utilizando glutatión como donador de electrones. Al limitar la acumulación de especies reactivas de oxígeno, GPX1 ayuda a mantener la homeostasis redox e influye en redes de señalización vinculadas a las respuestas al estrés oxidativo, incluidos los programas regulados por NRF2, la función mitocondrial y las vías inflamatorias. La alteración de la actividad de GPX1 se ha asociado con mecanismos relevantes para la biología del cáncer, la disfunción metabólica, la neurodegeneración y la patología cardiovascular, donde el desequilibrio redox puede remodelar los fenotipos de supervivencia celular y adaptación al estrés. Como enzima de expresión amplia, GPX1 se utiliza con frecuencia para investigar cómo la capacidad antioxidante modula las respuestas al daño del ADN, la sensibilidad a la ferroptosis y las respuestas celulares a la hipoxia o a señales inflamatorias.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Glutathione Peroxidase 1/GPX1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GPX1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GPX1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GPX1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Glutathione Peroxidase 1/GPX1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GPX1 para la investigación de la señalización de Glutathione Peroxidase 1/GPX1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de GPX1 críticos para la función de Glutathione Peroxidase 1/GPX1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GPX1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Glutathione Peroxidase 1/GPX1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Glutathione Peroxidase 1/GPX1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GPX1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Glutathione Peroxidase 1/GPX1 (h) y el plásmido HDR Glutathione Peroxidase 1/GPX1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GPX1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GPX1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.