Glut12 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-436139

Descripción general

Slc2a12 codifica el transportador de glucosa 12 (GLUT12), un transportador facilitativo de hexosas que favorece la captación de glucosa basal y dependiente de insulina según el tipo celular y el estado metabólico. En tejidos de ratón, GLUT12 contribuye a la homeostasis celular de la glucosa y se integra con vías que controlan el uso de energía, incluida la glucólisis, el metabolismo del glucógeno y la señalización de insulina/PI3K–AKT. Las alteraciones en la expresión o el tráfico de Slc2a12 se han asociado con la adaptación metabólica en tejidos sensibles a la insulina y pueden influir en fenotipos vinculados a obesidad, resistencia a la insulina y respuestas relacionadas de estrés cardiometabólico. El estudio de la función de Glut12 ayuda a aclarar cómo distintos miembros de la familia GLUT distribuyen el flujo de glucosa entre tejidos y cómo la redundancia de transportadores determina la resiliencia metabólica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Glut12 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Slc2a12 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Slc2a12 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Slc2a12 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Glut12.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Slc2a12 para la investigación de la señalización de Glut12, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Slc2a12 críticos para la función de Glut12
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Slc2a12 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Glut12 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Glut12 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Slc2a12. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Glut12 (m) y el plásmido HDR Glut12 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Slc2a12 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Slc2a12 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.