Plásmido Doble Nickase (h) Glucose Transporter Glut2: sc-400347-NIC

SLC2A2 codifica el transportador de glucosa GLUT2, un transportador facilitativo de hexosas que media el flujo bidireccional de glucosa a través de la membrana plasmática en tejidos metabólicamente activos, apoyando la detección de glucosa y el control homeostático del metabolismo de los carbohidratos. GLUT2 influye en el equilibrio energético celular al modular la disponibilidad de sustratos para la glucólisis y la señalización metabólica posterior, y contribuye a programas transcripcionales sensibles a los nutrientes en contextos endocrinos y epiteliales. La alteración de la expresión o la función de SLC2A2 se ha asociado con un manejo desregulado de la glucosa y con fenotipos relevantes para la diabetes y otros trastornos metabólicos relacionados, así como con efectos dependientes del transportador sobre la fisiología del transporte epitelial. En modelos celulares humanos, la perturbación de SLC2A2 se utiliza comúnmente para analizar la cinética de captación de glucosa, el flujo metabólico y las vías de detección de nutrientes.

Glucose Transporter Glut2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SLC2A2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SLC2A2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SLC2A2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SLC2A2 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.