Glucose Transporter Glut2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400347

Descripción general

SLC2A2 codifica el transportador de glucosa 2 (GLUT2), un transportador facilitador de hexosas que media el flujo bidireccional de glucosa a través de la membrana plasmática de manera dependiente de la concentración. En tejidos humanos, GLUT2 contribuye a la detección de nutrientes y a la homeostasis metabólica al favorecer la captación y la liberación de glucosa e influir en vías posteriores relacionadas con la glucólisis, la gluconeogénesis y la dinámica de la secreción de insulina. La alteración de la expresión o la función de SLC2A2 se ha asociado con una regulación anómala del manejo de la glucosa y con fenotipos metabólicos, lo que lo hace relevante para estudios sobre la biología de la diabetes, la producción hepática de glucosa y la función de los islotes pancreáticos. Dado que GLUT2 también puede transportar otras hexosas, la perturbación de SLC2A2 afecta un uso más amplio de carbohidratos y el equilibrio energético celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Glucose Transporter Glut2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SLC2A2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SLC2A2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SLC2A2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Glucose Transporter Glut2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SLC2A2 para la investigación de la señalización de Glucose Transporter Glut2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SLC2A2 críticos para la función de Glucose Transporter Glut2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SLC2A2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Glucose Transporter Glut2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Glucose Transporter Glut2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SLC2A2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Glucose Transporter Glut2 (h) y el plásmido HDR Glucose Transporter Glut2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SLC2A2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SLC2A2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.