Plásmido Doble Nickase (h) GH-2: sc-401171-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GH-2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GH-2 (h) y el plásmido de doble nickasa GH-2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GH2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GH-2 | sc-401171-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) GH-2 | sc-401171-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La hormona del crecimiento 2 (GH2) codifica GH-2, una variante placentaria de la hormona del crecimiento que activa la señalización del receptor de la hormona del crecimiento para influir en procesos sistémicos relacionados con el crecimiento y en la homeostasis metabólica. La actividad de GH-2 se asocia con la modulación de las vías JAK2/STAT, MAPK/ERK y PI3K/AKT, integrando señales endocrinas con programas transcripcionales que controlan la utilización de nutrientes y la regulación del eje del factor de crecimiento similar a la insulina (IGF). En biología humana, las alteraciones en la dinámica de la hormona del crecimiento placentaria se han vinculado con un crecimiento materno-fetal desregulado y con una adaptación metabólica anómala, lo que convierte a GH2 en un locus relevante para estudios mecanísticos de señalización endocrina. Dado que GH2 comparte similitud de secuencia y solapamiento funcional con otros miembros de la familia de la hormona del crecimiento, también resulta útil para analizar la regulación específica de parálogos y la interacción con el receptor en modelos celulares.
GH-2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GH2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GH2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GH2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GH2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.