GH-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401171

Descripción general

El gen humano **GH2** codifica la **hormona del crecimiento 2 (GH-2)**, una hormona peptídica de origen hipofisario que activa la señalización del receptor de la hormona del crecimiento para regular el crecimiento somático, la distribución de nutrientes y la homeostasis metabólica. La actividad de las vías aguas abajo incluye programas transcripcionales mediados por **JAK2/STAT**, con interacciones cruzadas con la regulación del eje de **IGF**, lo que influye en la proliferación y diferenciación celular, así como en la remodelación tisular. Las alteraciones en la señalización de la hormona del crecimiento se han asociado con fenotipos endocrinos y metabólicos y son relevantes para estudiar el control del crecimiento desregulado en contextos vinculados a enfermedades.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO GH-2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GH2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GH2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GH2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GH-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GH2 para la investigación de la señalización de GH-2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de GH2 críticos para la función de GH-2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GH2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido GH-2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GH-2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GH2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GH-2 (h) y el plásmido HDR GH-2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GH2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GH2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.