GGPS1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-404003

Übersicht

GGPS1 kodiert die Geranylgeranyl-Diphosphat-Synthase 1, ein Schlüsselenzym des Mevalonatwegs, der Geranylgeranyl-Diphosphat (GGPP) produziert – einen essenziellen isoprenoiden Lipidvorläufer. GGPP ermöglicht die Prenylierung von Proteinen und damit deren Membranassoziation sowie die Signalaktivität kleiner GTPasen wie Mitgliedern der RAS-, RHO- und RAB-Familie; dadurch beeinflusst es Vesikeltransport, Zytoskelettdynamik und Proliferation. Durch die Regulation des Isoprenoidflusses und der Prenylierungskapazität trägt GGPS1 zur metabolischen Kontrolle mitochondrialer und ER-assoziierter Prozesse bei und ist mit der Cholesterin- und Dolichol-Biosynthese verknüpft. Eine Fehlregulation der Mevalonat‑Prenylierungsachse und eine veränderte GGPS1-Aktivität wurden mit onkogenen Signalabhängigkeiten sowie weiteren Erkrankungen in Zusammenhang gebracht, die den Lipidstoffwechsel und den Proteintransport betreffen.

Das GGPS1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des GGPS1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des GGPS1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von GGPS1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die GGPS1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von GGPS1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der GGPS1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf GGPS1-Exone abzielen, die für die GGPS1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere GGPS1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom GGPS1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom GGPS1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des GGPS1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das GGPS1 HDR-Plasmid (h) und GGPS1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von GGPS1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten GGPS1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.