GDF-10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406826
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GDF-10 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GDF-10, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GDF-10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406826 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
GDF10 codifica o fator de diferenciação do crescimento 10 (GDF-10), um ligante secretado da superfamília do TGF-β, implicado na regulação da diferenciação celular, do padrão de formação dos tecidos e da remodelação da matriz extracelular. O GDF-10 sinaliza por meio de receptores quinase de serina/treonina para ativar programas transcricionais canônicos dependentes de SMAD e interagir com a crosstalk mais ampla das vias TGF-β/BMP, que molda decisões de destino celular e respostas do estroma. Alterações na expressão de GDF10 têm sido associadas, na literatura, a processos de desenvolvimento desregulados e a programas de remodelação aberrantes relevantes para microambientes fibróticos e associados a tumores. In vitro, o GDF-10 é frequentemente estudado por seus efeitos no comprometimento de linhagem, na migração e no controle de crescimento dependente do contexto em modelos celulares humanos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GDF-10 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GDF10 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GDF10, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GDF10 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GDF-10.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GDF10 para a investigação da sinalização de GDF-10, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GDF10 críticos para a função GDF-10
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GDF10 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GDF-10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GDF-10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GDF10. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GDF-10 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GDF-10 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GDF10 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GDF10 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.