Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GCP2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404751
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- GCP2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico GCP2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: GCP2 Anticuerpo (F-3): sc-377117
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
GCP2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404751 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
TUBGCP2 codifica la proteína 2 del complejo de γ-tubulina (GCP2), un componente central del complejo en anillo de γ-tubulina (γTuRC) que nuclea microtúbulos en los centrosomas y en otros centros organizadores de microtúbulos. GCP2 contribuye al ensamblaje del huso mitótico, a la maduración del centrosoma y al mantenimiento de la polaridad de los microtúbulos, influyendo así en la progresión del ciclo celular y en la segregación cromosómica. A través de su papel en la integridad del centrosoma y del huso, las alteraciones en la función de TUBGCP2 son relevantes para vías asociadas con la inestabilidad genómica y fenotipos proliferativos. La disrupción de componentes del γTuRC se investiga con frecuencia en el contexto de anomalías del centrosoma, aneuploidía y defectos del citoesqueleto observados en múltiples estados celulares asociados a enfermedades.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO GCP2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TUBGCP2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TUBGCP2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TUBGCP2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GCP2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TUBGCP2 para la investigación de la señalización de GCP2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de TUBGCP2 críticos para la función de GCP2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TUBGCP2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido GCP2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GCP2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TUBGCP2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GCP2 (h) y el plásmido HDR GCP2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TUBGCP2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TUBGCP2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.