Plásmido Doble Nickase (m) GBX2: sc-420503-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)GBX2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GBX2 (m) y el plásmido de doble nickasa GBX2 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Gbx2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) GBX2 | sc-420503-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) GBX2 | sc-420503-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Gbx2 codifica el factor de transcripción homeobox GBX2, un regulador de unión al ADN específico de secuencia que organiza el embrión temprano y ayuda a definir la identidad regional dentro del tubo neural y el rombencéfalo en desarrollo. En el ratón, la actividad de GBX2 se integra con redes de señalización del desarrollo, incluidas las vías WNT/β-catenina, FGF y del ácido retinoico, para coordinar la especificación de progenitores, la segmentación y la diferenciación neuronal. La alteración de Gbx2 modifica programas transcripcionales que controlan decisiones de destino celular y la morfogénesis tisular, lo que lo hace relevante para estudios de fenotipos congénitos del neurodesarrollo y de redes de regulación génica. Como factor de transcripción nuclear, GBX2 también se utiliza como marcador y como nodo mecanístico para analizar la progresión de linaje y el control espaciotemporal de la expresión génica durante el desarrollo.
GBX2 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Gbx2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Gbx2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Gbx2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Gbx2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.