Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
GBP2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402140
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- GBP2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico GBP2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: GBP2 Anticuerpo (G-9): sc-271568
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
GBP2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402140 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
La proteína 2 de unión a guanilato (GBP2) es una GTPasa grande inducible por interferón implicada en la defensa intrínseca celular y en la señalización asociada a la inflamación. GBP2 se localiza en compartimentos citosólicos y membranosos, donde participa en redes de genes estimulados por interferón, en la regulación de procesos restrictivos frente a patógenos y en la modulación de vías de señalización inmunitaria. Su actividad vincula la activación de la inmunidad innata con efectos posteriores sobre las respuestas celulares al estrés, programas transcripcionales impulsados por citocinas y la remodelación de membranas intracelulares. La expresión desregulada de GBP2 y la activación de la vía del interferón se han asociado con estados inflamatorios y fenotipos de inmuno-oncología, lo que convierte a GBP2 en un nodo útil para estudios mecanísticos de la respuesta del huésped y la regulación inmunitaria.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO GBP2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GBP2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GBP2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GBP2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GBP2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GBP2 para la investigación de la señalización de GBP2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de GBP2 críticos para la función de GBP2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GBP2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido GBP2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GBP2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GBP2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GBP2 (h) y el plásmido HDR GBP2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GBP2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GBP2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.