galectin-2 CRISPR Activationプラスミド (h): sc-405948-ACT

ヒトLGALS2はガレクチン-2をコードしており、ガレクチン-2はβ-ガラクトシド結合性レクチンとして、膜タンパク質および細胞外タンパク質上の特定の糖鎖モチーフを認識することで、細胞—細胞間および細胞—細胞外マトリックス間の相互作用を調節します。ガレクチン-2は免疫細胞の活性や炎症シグナルの制御に関与し、白血球接着、上皮バリア応答、サイトカイン駆動性ネットワークなどのプロセスに影響を与えます。レクチン—糖鎖結合を介して、アポトーシス、自然免疫の活性化、組織恒常性に関連する経路にも作用し得ます。LGALS2の発現変動は炎症関連および心血管系の表現型と関連づけられており、疾患生物学の研究における機序解明の標的としての重要性が示唆されています。

galectin-2 CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性LGALS2の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

galectin-2 CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における LGALS2 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はLGALS2転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性galectin-2の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のLGALS2遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるgalectin-2依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびLGALS2発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるgalectin-2経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。