Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Gads Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421689
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Gads O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Gads, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Gads Anticorpo (UW40): sc-73652
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Gads Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421689 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Grap2 codifica a proteína adaptadora Gads, um componente de sinalização hematopoética que conecta receptores imunes ativados a vias efetoras a jusante. Em células T, a Gads acopla a LAT fosforilada à SLP-76 para montar microaglomerados de sinalização que propagam a sinalização proximal do receptor de células T, facilitando a ativação da PLCγ1, o influxo de cálcio, a sinalização por MAPK e programas transcricionais que controlam a produção de citocinas e a proliferação. Essa proteína adaptadora também participa da sinalização de outros imunorreceptores em linhagens linfoides, influenciando os limiares de ativação celular e a organização da sinapse imune. Redes de sinalização dependentes de Gads desreguladas são frequentemente investigadas em modelos de disfunção imune, fenótipos inflamatórios e anormalidades de sinalização hematopoética.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Gads (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Grap2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Grap2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Grap2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Gads.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Grap2 para a investigação da sinalização de Gads, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Grap2 críticos para a função Gads
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Grap2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Gads Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Gads Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Grap2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Gads Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Gads (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Grap2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Grap2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.