Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) GABAA Rα2: sc-402715-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GABAA Rα2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GABAA Rα2 (h) y el plásmido de doble nickasa GABAA Rα2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GABRA2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GABAA Rα2 | sc-402715-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) GABAA Rα2 | sc-402715-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABRA2 codifica la subunidad α2 del receptor GABA\(_A\) humano, un componente central de los canales de cloruro pentaméricos activados por ligando que median la neurotransmisión inhibitoria rápida en el sistema nervioso central. Al modular la conductancia de cloruro, GABA\(_A\)Rα2 influye en la excitabilidad neuronal, la integración sináptica y las oscilaciones de red, lo que la vincula con la función de circuitos dependiente de la actividad y con el equilibrio entre excitación e inhibición. Esta subunidad receptora participa en la señalización de las sinapsis GABAérgicas e interactúa con la maquinaria de andamiaje y de tráfico intracelular que regula la localización del receptor y su desensibilización. La variación genética y regulatoria en GABRA2 se ha asociado con fenotipos neuropsiquiátricos y neurológicos, lo que respalda su relevancia para estudios mecanísticos en modelos neuronales.
GABAA Rα2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GABRA2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GABRA2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GABRA2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GABRA2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.