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G530011O06Rik慢病毒激活颗粒(m) | sc-437289-LAC | 200 µl | $455.00 |
小鼠 G530011O06Rik 编码一种在很大程度上尚未表征的蛋白质,功能注释有限,常在转录组学和系统生物学研究中被作为对象,用于解析细胞状态的新型调控因子。现有表达数据提示其调控具有情境依赖性,可能与转录调控、RNA 代谢或与信号转导相关的基因网络等基础过程有关。由于该基因在通路中的定位尚不完全明确,研究者常采用扰动(干预)实验来绘制其下游转录程序及相互作用通路。像 G530011O06Rik 这类表征不足的 RIKEN 基因,其表达改变常在与疾病相关的模型(包括炎症、代谢应激和神经生物学表型)中作为生物标志物或潜在调节因素进行研究,但并不意味着存在因果关系。
G530011O06Rik 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 G530011O06Rik 表达。
G530011O06Rik 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在G530011O06Rik转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性G530011O06Rik表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 G530011O06Rik 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。