Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
FXR1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420430
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- FXR1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico FXR1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: FXR1 Anticuerpo (B-2): sc-374148
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
FXR1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420430 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Fxr1 codifica la proteína 1 relacionada con el síndrome del X frágil y la discapacidad intelectual (FXR1), una proteína de unión a ARN que regula la expresión génica postranscripcional mediante el control de la estabilidad, localización y traducción del ARNm. FXR1 se asocia con gránulos ribonucleoproteicos y participa en programas de metabolismo del ARN que configuran el crecimiento y la diferenciación celulares, así como las respuestas al estrés, incluida la modulación de transcritos relacionados con el citoesqueleto y el músculo. En el ratón, Fxr1 contribuye a la expresión génica específica de tejido y a procesos del desarrollo en los que se requiere un control translacional estricto. La desregulación de redes de ARN dependientes de FXR1 se ha vinculado en la literatura con alteraciones en las señales de proliferación y supervivencia, y con fenotipos relevantes para la biología del neurodesarrollo y la neuromuscular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO FXR1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Fxr1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Fxr1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Fxr1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FXR1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Fxr1 para la investigación de la señalización de FXR1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Fxr1 críticos para la función de FXR1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Fxr1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido FXR1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido FXR1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Fxr1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FXR1 (m) y el plásmido HDR FXR1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Fxr1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Fxr1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.