Plasmide Double Nickase (h) FucT-VII: sc-408027-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FucT-VII correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FucT-VII Double Nickase (h) et le plasmide FucT-VII Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FUT7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FucT-VII | sc-408027-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FucT-VII | sc-408027-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FUT7 code l’α1,3‑fucosyltransférase VII (FucT‑VII), une glycosyltransférase localisée dans l’appareil de Golgi qui catalyse les étapes terminales de fucosylation nécessaires à la synthèse du sialyl‑Lewis X et de glycannes fucosylés apparentés. Cette activité est au cœur de la biologie de l’adhésion des leucocytes, car elle permet la formation de ligands fonctionnels des sélectines sur les glycoprotéines et les glycolipides, soutenant le roulement et le recrutement des leucocytes lors de l’inflammation. La glycosylation médiée par FUT7 s’inscrit dans des voies plus larges de biosynthèse des glycannes qui façonnent la reconnaissance cellule–cellule, la signalisation des récepteurs et l’architecture de surface des cellules immunitaires. Des modifications de l’expression de FUT7 ou des profils de fucosylation ont été associées à des réponses inflammatoires dérégulées et à un remodelage tumoral des glycannes, ce qui en fait une cible utile pour des études mécanistiques de l’adhésion et des interactions glyco‑immunitaires.
FucT-VII Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FUT7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FUT7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FUT7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FUT7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.