Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) FRP-3: sc-402504-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)FRP-3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa FRP-3 (h) y el plásmido de doble nickasa FRP-3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a FRZB. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: FRP-3 Anticuerpo (B-5): sc-514350
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) FRP-3 | sc-402504-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) FRP-3 | sc-402504-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El FRZB humano codifica la proteína 3 relacionada con Frizzled (FRP-3), un antagonista secretado de Wnt que se une a ligandos Wnt y modula su interacción con los receptores Frizzled para ajustar la transcripción dependiente de β-catenina. Al limitar la señalización Wnt canónica, FRP-3 influye en decisiones de destino celular, la remodelación de la matriz extracelular y programas de diferenciación en tejidos mesenquimales y esqueléticos. La alteración de la actividad de FRZB se ha asociado con una desregulación de las salidas de la vía Wnt relevante para la homeostasis del cartílago y la degeneración osteoarticular, y con frecuencia se estudia como un regulador dependiente del contexto de la señalización asociada a tumores. Por lo tanto, la perturbación de FRZB es útil para investigar el control de gradientes de Wnt, el “crosstalk” entre vías y las redes transcripcionales que gobiernan la proliferación y la diferenciación.
FRP-3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FRZB en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FRZB. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FRZB. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FRZB alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.