frizzled-10 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406690
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- frizzled-10 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico frizzled-10, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
frizzled-10 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406690 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
FZD10 codifica frizzled-10, un receptor WNT de siete dominios transmembrana que regula la transducción de señales a través de la transcripción canónica dependiente de β-catenina y de vías no canónicas que controlan la polaridad celular planar y el flujo de calcio. Al modular las interacciones receptor–ligando en la superficie celular, frizzled-10 influye en el patronamiento del desarrollo, los programas epitelio–mesénquima y la homeostasis tisular. La actividad desregulada de FZD10 y la señalización WNT/Frizzled alterada se estudian con frecuencia en el contexto de redes de señalización oncogénica, la invasión de células tumorales y estados de diferenciación aberrantes. FZD10 también se utiliza como un nodo de la vía para analizar la comunicación cruzada entre señales WNT y programas transcripcionales sensibles a factores de crecimiento.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO frizzled-10 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FZD10 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FZD10 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FZD10 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína frizzled-10.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FZD10 para la investigación de la señalización de frizzled-10, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de FZD10 críticos para la función de frizzled-10
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FZD10 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido frizzled-10 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido frizzled-10 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FZD10. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR frizzled-10 (h) y el plásmido HDR frizzled-10 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FZD10 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FZD10 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.