Plásmido Doble Nickase (m) fractalkine: sc-422853-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)fractalkine consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa fractalkine (m) y el plásmido de doble nickasa fractalkine (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Cx3cl1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) fractalkine | sc-422853-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) fractalkine | sc-422853-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen murino **Cx3cl1** codifica la fractalquina (CX3CL1), una quimiocina CX3C única que se presenta tanto como una molécula de adhesión anclada a la membrana como, tras su desprendimiento proteolítico, como un quimioatrayente soluble. Al unirse a CX3CR1, la fractalquina regula la adhesión de leucocitos, la quimiotaxis y la supervivencia, integrando la señalización inflamatoria con las interacciones célula–célula en compartimentos vasculares, neurales e inmunitarios. Este eje modula la comunicación microglía–neurona, el tráfico de monocitos y la activación endotelial, influyendo en procesos como la remodelación sináptica, la vigilancia tisular y el reclutamiento impulsado por citocinas. La desregulación de la señalización CX3CL1/CX3CR1 se ha implicado en la neuroinflamación, la aterosclerosis y estados inflamatorios crónicos, lo que convierte a **Cx3cl1** en una diana útil para analizar el diálogo cruzado entre el sistema inmune y los tejidos.
fractalkine El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Cx3cl1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Cx3cl1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Cx3cl1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Cx3cl1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.