fractalkine Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422853
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- fractalkine El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico fractalkine, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
fractalkine Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422853 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Cx3cl1 codifica la fractalquina (CX3CL1), una quimiocina única, tanto anclada a la membrana como soluble, que señaliza a través de CX3CR1 para regular la adhesión, la quimiotaxis y la supervivencia de los leucocitos. En tejidos de ratón, la fractalquina contribuye a la comunicación neuroinmunitaria al modular las interacciones entre microglía y neuronas y al dar forma a las respuestas inflamatorias en el SNC y en órganos periféricos. Este eje se integra con programas de tráfico celular impulsados por quimiocinas y con mecanismos de adhesión que influyen en el reclutamiento de células mieloides, la inflamación vascular y la remodelación tisular. La señalización CX3CL1–CX3CR1 desregulada se estudia con frecuencia en contextos de neuroinflamación, patología vascular tipo aterosclerosis y modelos de enfermedades inflamatorias crónicas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO fractalkine (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cx3cl1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cx3cl1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cx3cl1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína fractalkine.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cx3cl1 para la investigación de la señalización de fractalkine, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Cx3cl1 críticos para la función de fractalkine
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cx3cl1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido fractalkine CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido fractalkine CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cx3cl1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR fractalkine (m) y el plásmido HDR fractalkine (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cx3cl1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cx3cl1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.