Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Fra2 (m): sc-420403
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Fra2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Fra2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Fra2 Antibody (G-5): sc-166102
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Fra2 (m) | sc-420403 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Fosl2 code Fra2 (antigène 2 de type FOS), un facteur de transcription à fermeture éclair leucine basique (bZIP) qui se dimérise avec des protéines JUN pour former des complexes AP‑1 contrôlant l’expression génique dépendante des stimuli. Dans les cellules murines, Fra2 intègre les signalisations MAPK/ERK et JNK afin de réguler des programmes liés à la prolifération, à la différenciation, au remodelage de la matrice extracellulaire et aux réponses au stress. L’activité de Fra2 influence les choix de lignage dans les compartiments osseux et immunitaires et module des circuits transcriptionnels inflammatoires. Une dérégulation de la signalisation AP‑1/Fra2 a été associée à un remodelage pathologique et à des états transcriptionnels oncogéniques, faisant de Fosl2 un nœud utile pour des études mécanistiques du contrôle transcriptionnel spécifique au contexte.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Fra2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Fosl2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Fosl2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Fosl2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Fra2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Fosl2 pour l'étude de la signalisation de Fra2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Fosl2 essentiels à la fonction de Fra2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Fosl2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Fra2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Fra2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Fosl2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Fra2 plasmide HDR (m) et le Fra2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Fosl2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Fosl2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.