Partículas Lentivirales de Activación (h) Fra1: sc-400527-LAC

FOSL1 codifica Fra1 (antígeno 1 similar a Fos), un factor de transcripción con cremallera de leucina básica que forma heterodímeros con proteínas JUN para constituir el complejo AP-1 y regular programas de expresión génica dependientes de estímulos. Fra1 integra señales de MAPK/ERK, JNK y otras vías sensibles al estrés para modular la progresión del ciclo celular, la diferenciación, la migración y la remodelación de la matriz extracelular. La actividad desregulada de FOSL1 se ha vinculado con redes transcripcionales oncogénicas, fenotipos tipo transición epitelio‑mesénquima y señalización inflamatoria alterada en múltiples contextos tisulares. Como regulador transcripcional, Fra1 se utiliza con frecuencia como un nodo para estudiar la regulación génica impulsada por potenciadores (enhancers) y el diálogo cruzado entre vías aguas abajo de la señalización por factores de crecimiento y citocinas.

Las partículas de activación lentiviral Fra1 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de FOSL1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Fra1 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción FOSL1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Fra1. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo FOSL1 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.