Plasmide Double Nickase (h) FOXI1: sc-408728-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FOXI1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FOXI1 Double Nickase (h) et le plasmide FOXI1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FOXI1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FOXI1 | sc-408728-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FOXI1 | sc-408728-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FOXI1 (forkhead box I1) est un facteur de transcription à hélice ailée qui régule la spécification des lignages épithéliaux et les programmes de transport ionique, en particulier dans l’oreille interne et le rein. Il module des réseaux transcriptionnels contrôlant l’homéostasie acido-basique et l’expression de gènes de canaux et de transporteurs, en s’intégrant à des voies plus larges de développement et de différenciation gouvernées par les facteurs de la famille forkhead. Des altérations génétiques de FOXI1 ont été associées à des troubles syndromiques et non syndromiques impliquant la fonction tubulaire rénale distale et la physiologie auditive, ce qui en fait un nœud utile pour étudier la maturation épithéliale et le contrôle transcriptionnel spécifique d’un organe. Dans des modèles cellulaires, l’activité de FOXI1 peut être explorée afin de relier la régulation transcriptionnelle à des modifications en aval de l’expression des transporteurs, de la polarisation cellulaire et des voies de signalisation de réponse au stress.
FOXI1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FOXI1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FOXI1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FOXI1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FOXI1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.