FOXE3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404466-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FOXE3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase FOXE3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase FOXE3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FOXE3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FOXE3 Anticorpo (G-1): sc-393526
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FOXE3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404466-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FOXE3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404466-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FOXE3 codifica um fator de transcrição da família forkhead box essencial para o desenvolvimento do segmento anterior e do cristalino, no qual regula programas de expressão gênica que controlam a proliferação, a diferenciação e a manutenção da identidade das células epiteliais do cristalino. Por meio da ligação ao DNA via seu domínio forkhead, o FOXE3 influencia redes transcricionais do desenvolvimento e processos ligados ao ciclo celular que moldam a morfogênese ocular e preservam a transparência do tecido. A desregulação ou a perda de função do FOXE3 está associada a distúrbios oculares congênitos, incluindo disgenesia do segmento anterior e fenótipos de catarata, tornando-o um alvo relevante para o estudo do desenvolvimento ocular humano e dos mecanismos de doença. Assim, o FOXE3 é amplamente utilizado como marcador e regulador em modelos de biologia do cristalino, controle transcricional e genética do desenvolvimento.
FOXE3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FOXE3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FOXE3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FOXE3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FOXE3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.