FOXC2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420370

Descripción general

Foxc2 codifica el factor de transcripción de tipo forkhead FOXC2, un regulador de unión al ADN que coordina programas de expresión génica que controlan la identidad de las células mesenquimales, el desarrollo vascular y linfático, y la remodelación del tejido adiposo en el ratón. FOXC2 actúa dentro de redes transcripcionales nucleares que se cruzan con vías de señalización del desarrollo como TGF-β y Notch para influir en la diferenciación endotelial, la organización de la matriz extracelular y procesos similares a la transición epitelio–mesénquima. La actividad alterada de FOXC2 se ha vinculado con una linfangiogénesis desregulada, un patrón vascular aberrante y cambios en estados metabólicos y del estroma que se investigan comúnmente en modelos de trastornos del desarrollo y de biología del microambiente tumoral. Estas funciones convierten a Foxc2 en un nodo útil para diseccionar el control transcripcional de la morfogénesis tisular y las decisiones de destino celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO FOXC2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Foxc2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Foxc2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Foxc2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FOXC2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Foxc2 para la investigación de la señalización de FOXC2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Foxc2 críticos para la función de FOXC2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Foxc2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido FOXC2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido FOXC2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Foxc2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FOXC2 (m) y el plásmido HDR FOXC2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Foxc2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Foxc2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.