Plásmido Doble Nickase (h) Fnk: sc-404710-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Fnk consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Fnk (h) y el plásmido de doble nickasa Fnk (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a PLK3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Fnk | sc-404710-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Fnk | sc-404710-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PLK3 codifica la quinasa serina/treonina Fnk, un miembro de la familia de quinasas tipo polo implicado en las respuestas al estrés celular y en la señalización de puntos de control. Fnk participa en vías que coordinan la detección del daño en el ADN, la progresión del ciclo celular y la apoptosis, y se han descrito funciones en la modulación de la señalización relacionada con MAPK y otras redes dependientes de fosforilación. Al regular sustratos proteicos durante condiciones proliferativas y de estrés, PLK3 contribuye a mantener la estabilidad genómica y a decisiones controladas sobre el destino celular. La desregulación de la expresión o la actividad de PLK3 se ha asociado con programas alterados de proliferación y supervivencia, relevantes para la biología del cáncer y otras afecciones caracterizadas por un control defectuoso de los puntos de control.
Fnk El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PLK3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PLK3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PLK3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PLK3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.