FKBP6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406798

Übersicht

FKBP6 kodiert das FK506-bindende Protein 6, ein Immunophilin mit Peptidyl‑Prolyl‑cis/trans‑Isomerase-Aktivität, das die Proteinfaltung sowie die chaperonabhängige Reifung im Zytoplasma und im Zellkern unterstützt. In der Keimbahn ist FKBP6 an der meiotischen Progression und an der Funktion des synaptonemalen Komplexes beteiligt, indem es Protein‑Protein‑Interaktionen koordiniert, die für die Paarung homologer Chromosomen und die Rekombination erforderlich sind. Eine Störung von FKBP6 wurde mit Defekten der Spermatogenese und männlichen Infertilitätsphänotypen in Verbindung gebracht und bietet damit einen nützlichen Ansatzpunkt zur Untersuchung der Reproduktionsbiologie und der meioseassoziierten Qualitätskontrolle. Seine molekularen Funktionen sind zudem in umfassendere Proteostase-Netzwerke eingebunden, die durch Immunophiline und HSP90-assoziierte Komplexe gesteuert werden und die Stabilität und den Transport von Client-Proteinen beeinflussen.

Das FKBP6 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des FKBP6-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des FKBP6-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von FKBP6 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die FKBP6-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von FKBP6-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der FKBP6-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf FKBP6-Exone abzielen, die für die FKBP6-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere FKBP6-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom FKBP6 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom FKBP6 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des FKBP6-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das FKBP6 HDR-Plasmid (h) und FKBP6 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von FKBP6-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten FKBP6-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.