FKBP6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406798

概要

FKBP6は、免疫フィリンの一種であるFK506結合タンパク質6をコードしており、ペプチジルプロリルcis–trans異性化酵素活性を介して、細胞質および核内でのタンパク質フォールディングやシャペロン依存的な成熟を支えます。生殖系列では、FKBP6は減数分裂の進行およびシナプトネマ複合体の機能に関与し、相同染色体の対合や組換えに必要なタンパク質間相互作用を調整します。FKBP6の機能破綻は、精子形成の異常や男性不妊の表現型と関連づけられており、生殖生物学や減数分裂に伴う品質管理を研究するうえで有用な切り口となります。さらに、その分子機能は、免疫フィリンやHSP90関連複合体によって制御され、クライアントタンパク質の安定性や輸送に影響を与える、より広範なプロテオスタシスネットワークとも結びついています。

FKBP6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFKBP6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FKBP6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FKBP6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FKBP6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FKBP6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FKBP6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FKBP6の機能に不可欠なFKBP6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FKBP6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FKBP6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFKBP6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FKBP6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FKBP6 HDRプラスミド（h）および FKBP6 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFKBP6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFKBP6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。