Plásmido Doble Nickase (h) FKBP11: sc-405563-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)FKBP11 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa FKBP11 (h) y el plásmido de doble nickasa FKBP11 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a FKBP11. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: FKBP11 Anticuerpo (D-3): sc-398700
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) FKBP11 | sc-405563-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) FKBP11 | sc-405563-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FKBP11 codifica un miembro de la familia de proteínas de unión a FK506 localizado en el retículo endoplásmico, con actividad de isomerasa peptidil-prolil cis–trans, que favorece el plegamiento de proteínas y el control de calidad en la vía secretora. Se encuentra enriquecido en estados celulares secretadores de anticuerpos y en otros estados altamente secretorios, donde contribuye a la proteostasis del RE, al plegamiento de polipéptidos nacientes y a la coordinación de la señalización de la respuesta a proteínas mal plegadas. A través de estas funciones, FKBP11 se asocia con la adaptación celular al estrés del RE y con la regulación de la maduración y el tráfico de proteínas. La homeostasis del RE alterada en la que participa FKBP11 se ha investigado en contextos de inflamación crónica, diferenciación de células inmunitarias y fisiopatología asociada al estrés, donde se modifican la carga secretora y la capacidad de proteostasis.
FKBP11 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FKBP11 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FKBP11. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FKBP11. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FKBP11 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.