FIGNL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-410087

概要

FIGNL1（fidgetin-like 1）はAAA+ ATPアーゼをコードし、相同組換え機構との相互作用を介してDNA修復およびゲノム維持の制御に関与すると考えられています。このタンパク質はRAD51フィラメントの動態やDNA末端処理の制御と関連づけられており、複製に伴う損傷や二本鎖切断を解決する経路とのつながりが示されています。組換えの帰結や染色体の安定性に影響を与えることで、FIGNL1は細胞周期の進行と遺伝情報の忠実な分配に寄与します。FIGNL1の活性や発現の異常は、がん生物学をはじめ、ゲノム不安定性が重要な特徴となる状況で観察されるDNA損傷応答の変化と関連していると報告されています。

FIGNL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFIGNL1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FIGNL1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FIGNL1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FIGNL1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FIGNL1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FIGNL1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FIGNL1の機能に不可欠なFIGNL1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FIGNL1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FIGNL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFIGNL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FIGNL1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FIGNL1 HDRプラスミド（h）および FIGNL1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFIGNL1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFIGNL1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。