Fibromodulin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401610

Descripción general

FMOD codifica la fibromodulina, un proteoglucano pequeño rico en leucina de la matriz extracelular que se une a las fibrillas de colágeno y ayuda a regular la fibrilogénesis, la arquitectura de la matriz y las propiedades mecánicas del tejido. La fibromodulina modula la señalización de factores de crecimiento, incluidas interacciones con las vías de la familia TGF-β, y contribuye a la comunicación célula–matriz que afecta a la adhesión, la migración y los programas de reparación de heridas. La alteración de la expresión de FMOD o de la organización de la MEC se ha asociado con remodelado fibrótico y respuestas estromales desreguladas en múltiples tejidos. Como componente de la matriz que influye en el depósito de colágeno y la disponibilidad de señales, FMOD se estudia con frecuencia en biología del tejido conectivo, remodelado asociado a la inflamación e investigación del microambiente tumoral.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Fibromodulin (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FMOD en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FMOD junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FMOD tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Fibromodulin.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FMOD para la investigación de la señalización de Fibromodulin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de FMOD críticos para la función de Fibromodulin
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FMOD para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Fibromodulin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Fibromodulin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FMOD. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Fibromodulin (h) y el plásmido HDR Fibromodulin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FMOD para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FMOD definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.